摘要: 目的 建立对表阿霉素抵抗的小鼠源三阴性乳腺癌耐药细胞4T1/EPI，对其生物学特性和耐药性进行评价。方法 采用体外EPI浓度逐步递增间歇诱导的方法建立EPI耐药细胞系4T1/EPI。倒置显微镜下观察耐药细胞株形态变化，体外实验检测其耐药系数（MTT法），细胞倍增时间（CCK-8法），划痕愈合试验检测EPI耐药对三阴性乳腺癌细胞迁移能力的影响，Western-blot检测细胞耐药相关蛋白的表达，验证其耐药性。采用转录组测序技术及KEGG通路富集分析筛选EPI耐药机制相关的通路和靶点，并进行验证。结果 4T1细胞最终能在含100ng/mL EPI的培养基中正常生长，此细胞即为EPI耐药细胞系4T1/EPI。4T1细胞对 EPI产生稳定耐药后，显微镜下可见细胞形态上的改变；与4T1细胞相比，4T1/EPI细胞的细胞倍增时间明显延长（P＜0.01），细胞迁移能力增强（P＜0.05）；4T1/EPI细胞的耐药蛋白MDR1、MRP1（P＜0.01）及ABCG2（P＜0.05）的表达水平均高于亲本细胞；4T1/EPI细胞体内模型瘤重、瘤体积结果显示其对EPI具有显著耐药性。测序结果主要涉及PI3K/AKT信号通路和ABC转运蛋白通路，靶点验证实验结果显示，与4T1细胞比较，4T1/EPI细胞中Erbb3、Egfr、PI3K、AKT的表达均上调（P＜0.05），而Fgfr1的表达显著下调（P＜0.01）。结论 成功构建了TNBC耐药细胞株4T1/EPI，该细胞体内外均具有显著EPI耐药性，且耐药形成机制可能与EPI上调Egfr、Erbb3表达，激活PI3K/AKT信号通路上调ABC转运蛋白表达有关。