Mechanism of HIF-1α Promoting Malignant Development of Nasopharyngeal Carcinoma by Upregulating PD-L1 Under Hypoxic Conditions
-
摘要:目的
探讨乏氧条件下HIF-1α通过上调PD-L1促进鼻咽癌恶性发展的机制。
方法选取人类鼻咽癌细胞系CNE2细胞进行实验。设置常氧组(20%O2)、乏氧组(1%O2)、HIF-1α-siRNA+乏氧组和NC-siRNA+乏氧组。MTT实验检测各组细胞增殖率；流式细胞术检测各组细胞凋亡；RT-PCR检测各组细胞中HIF-1α、STAT3和PD-L1 mRNA表达的变化；Western blot检测不同处理条件下各组细胞HIF-1α、STAT3和PD-L1蛋白表达的变化及STAT3磷酸化情况。
结果MTT实验显示，乏氧组和转染细胞增殖率显著高于常氧组(P=0.000)，HIF-1α-siRNA+乏氧组的细胞增殖率明显低于常氧组、乏氧组和NC-siRNA+乏氧组(P=0.000)。流式分析显示，HIF-1α-siRNA+乏氧组的细胞凋亡率显著高于其他三组(P=0.001)。RT-PCR检测显示，HIF-1α-siRNA+乏氧组的HIF-1α、PD-L1和STAT3 mRNA水平显著低于乏氧组和NC-siRNA+乏氧组。蛋白印迹结果显示，HIF-1α、PD-L1和STAT3蛋白表达趋势与mRNA分子水平趋势一致。HIF-1α-siRNA+乏氧组pSTAT3蛋白水平也显著低于乏氧组和NC-siRNA+乏氧组(P=0.001)。
结论乏氧微环境下HIF-1α有可能通过STAT3上调PD-L1表达，进而促进癌细胞免疫逃逸，导致鼻咽癌恶性发展。
Abstract:ObjectiveTo explore the mechanism of HIF-1α promoting malignant development of nasopharyngeal carcinoma by upregulating PD-L1 expression under hypoxic conditions.
MethodsCNE2 cells were divided into normoxia (20%O2), hypoxia (1%O2), HIF-1α-siRNA+hypoxia and NC-siRNA+hypoxia groups. Cell proliferation, apoptosis, the mRNA levels of HIF-1α, STAT3 and PD-L1, the protein levels of HIF-1α, PD-L1, STAT3 and STAT3 phosphorylation were detected by MTT assay, flow cytometry, RT-PCR and Western blot, respectively.
ResultsCell proliferation of hypoxia group was significantly higher than that of normoxia group (P=0.000). The cell proliferation rate of HIF-1α-siRNA+hypoxia group was significantly lower than those in other groups (P=0.000). The apoptosis rate of HIF-1α-siRNA+hypoxia group was remarkably higher than those in other groups (P=0.001). RT-PCR detection showed that the mRNA levels of HIF-1α, PD-L1 and STAT3 in the HIF-1α-siRNA+hypoxia group were significantly lower than those in hypoxia group and NC-siRNA+hypoxia group. The protein expression of HIF-1α, PD-L1 and STAT3 showed similar tendency in Western blot assays compared with the mRNA levels. The pSTAT3 protein expression level in HIF-1α-siRNA+hypoxia group was significantly lower than those in hypoxia group and HIF-1α-siRNA+hypoxia group (P=0.001).
ConclusionUnder hypoxic microenvironment, HIF-1α may up-regulate the expression of PD-L1 through STAT3, thereby promoting the immune escape of cancer cells, leading to the malignant development of nasopharyngeal carcinoma.
-
Key words:
- PD-L1 /
- HIF-1α /
- Nasopharyngeal carcinoma /
- Hypoxia
-
0 引言
宫颈癌在全球最常见的女性恶性肿瘤中排名第二，目前仍然是女性癌症相关死亡的主要原因之一。虽然宫颈癌早期可以通过根治手术辅以放化疗得以治愈，但是一些高危因素患者的预后仍然不容乐观[1]。目前的临床数据表明，影响宫颈癌预后的因素包括肿瘤大小、浸润深度、血管的侵犯、子宫旁组织的浸润、盆腔淋巴结转移等，其中盆腔淋巴结的转移被认为是影响术后疗效最重要的危险因素[2]。作为早期诊断及预后评估的分子指标，非编码RNA（non-coding RNA, ncRNAs）已日益得到重视和研究。近年研究表明ncRNAs与宫颈鳞状细胞癌的发生发展有密切关系，参与调控宫颈鳞状细胞癌进程的分子机制和雌孕激素表达[3]。
ncRNAs主要包括microRNAs和lncRNAs[4]。miRNA可通过调控靶基因从而促进宫颈癌细胞凋亡，并能改变肿瘤细胞对药物的敏感度，且能在组织、血清和血浆等标本中稳定存在。miRNA有望成为诊断宫颈癌的新标志物和治疗的新靶点[5]。近年来，lncRNA-miRNAs的调节关系吸引了越来越多学者的注意，lncRNAs和microRNAs的交互调节是目前的研究热点[6]。本研究探讨了LncRNA HCG11和miR-590-3p在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达，并且利用qRT-PCR结果和starBase v2.0数据库探讨两者之间的关系，结合患者的临床资料探讨LncRNA HCG11和miR-590-3p与性别、年龄、组织大小、病理分级、淋巴结转移、临床分期以及预后的关系。
1 资料与方法
1.1 临床资料
1.1.1 宫颈鳞状细胞组织样本和临床病理数据收集
2013年7月—2016年3月在南阳市第二人民医院妇科接受根治性子宫切除术和盆腔淋巴结清扫的58例宫颈鳞状细胞癌患者，年龄28~72岁。根据国际妇产科联合会（FIGO，2014）的诊断标准，58例宫颈鳞状细胞癌病例中，Ⅰ~Ⅱ期12例、Ⅲ~Ⅳ46例；20例有淋巴结转移、38例无淋巴结转移；分化良好（G1）13例、中度分化（G2）32例、低分化（G3）13例。所有患者术前均未接受化疗或放疗；所有病例均有病理组织学诊断支持；所有标本直接取自手术切除物，均为配对组织。每对为肿物和癌旁正常组织距离病灶≥5 cm，经病理证实无肿瘤细胞浸润各一份。在手术切除后10 min之内获得。取材后置于无菌冻存管中，储存至-80℃。所有患者均获得随访，末次随访时间为2016年8月，随访时间5~36月。
1.1.2 试剂与仪器
RNA提取试剂盒（天根生物公司，中国），RNA反转录试剂盒（诺维赞生物公司，美国），荧光定量PCR试剂盒（康为世纪生物公司，中国），Biotek Epoch微量核酸定量仪购自美国Biotek公司，7500荧光定量PCR仪购自美国ABI公司。
1.1.3 qRT-PCR检测基因LncRNA HCG11和miR-590-3p的引物序列
通过PCR引物设计软件Primer Premier 5.0设计LncRNA HCG11、GAPDH、has-miR-590-3p和U6的引物序列，具体序列如下：HCG11上游引物：5′-AGGAGTGGTTGCATTTGGGA-3′，下游引物：5′-CCCACCACGCAGTGAATAGT-3′；GAPDH上游引物：5'-GGAAGGACTCATGACCACAGTCC-3'，下游引物：5'-TCGCTGTI'GAAGTCAGAGGAGACC-3'。has-miR-590-3p-5p引物为5′-CCTGGCTTTTCATTCCTATGTGA-3′，U6引物为5′-GCTTCGGC AGCACATATACTAAA-3′，并由上海生工生物公司合成。引物干粉离心后用DEPC水配制成20 µmol/L，置于－20℃冰箱备用。
1.2 方法
1.2.1 总RNA的提取和反转录
从子宫颈鳞状细胞癌组织和癌旁组织中抽提总RNA，按总RNA提取试剂盒说明书进行，采用定量分光光度法在A260/280处对提取RNA进行定量。按照反转录试剂盒（诺维赞公司，R111-01/02）说明书对总RNA进行反转录，反转录反应由1 µg的总RNA，与10 µl 2×RT mix，2 µl mix，1 µl Oligo dNTPs，1 µl Random hexamers，6 µl ddH2O总体系20 µl。25℃ 5 min，50℃ 15 min，85℃ 5 min，经反转录形成cDNA。
1.2.2 qRT-PCR检测LncRNA HCG11和miR-590-3p
根据康为世纪生物公司实时PCR试剂盒说明书进行荧光定量PCR。实时PCR体系为20 µl : 2 µl反向转录产物，2 µl引物，2 µl反向引物，10 µl 2×mix，纯水4 µl。1个循环包括95℃ 30 s、95℃ 5 s和60℃ 30 s，总共40个循环。所有样本重复三次。以2-ΔCt表示基因的相对表达水平。
1.3 统计学方法
采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。计量资料以（x±s）表示，计数资料采用构成比（%）表示，58对配对的宫颈鳞状细胞癌和癌旁组织比较采用两配对样本t检验，与临床资料联合分析采用卡方检验，采用Kaplan-Meier法计算生存函数，差异比较采用Log rank检验，采用Cox比例风险模型用于宫颈鳞状细胞癌预后的多因素分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达
应用qRT-PCR检测58对配对的宫颈鳞状细胞癌组织及癌旁组织中LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达，以癌旁为参考值，通过配对样本t检验分析2-ΔCt值。结果显示宫颈鳞状细胞癌组织中LncRNA HCG11的平均表达量为（8.23±3.77）低于宫颈鳞状细胞癌癌旁组织（9.62±3.93），miR-590-3p平均表达量为（9.61±4.17）高于宫颈鳞状细胞癌癌旁组织（8.18±4.22），差异有统计学意义（t=3.249, P=0.0019; t=3.403, P=0.0012），见图 1。
![]()
图 1 58对配对的宫颈鳞状细胞癌组织及癌旁组织中LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达Figure 1 LncRNA HCG11 and miR-590-3p expression in 58 pairs of squamous carcinoma of cervix and adjacent non-tumor tissuesT: squamous carcinoma of cervix(SCC) tissues; N: adjacent non-tumor tissues; A: the expression of LncRNA HCG11 in SCC tissues was inferior to that in non-tumor tissues; B: the expression of miR-590-3p in squamous carcinoma of cervix tissues was superior to that in non-tumor tissues2.2 LncRNA HCG11和miR-590-3p表达相关性分析
通过NONCODE database分析我们知道LncRNA HCG11在宫颈癌细胞系HeLa中的相对表达量为1.874，见图 2A，说明宫颈癌细胞中可以检测到该基因的表达。通过starBase v2.0数据库分析了与LncRNA HCG11可以结合miRNA，发现miR-590-3p与LncRNA HCG11有三个结合位点，见图 2B。通过qRT-PCR结果，分析了宫颈鳞状细胞癌组织中LncRNA HCG11和miR-590-3p核酸水平的相关性，见图 2C，结果呈负相关（r=-0.642, P =0.000）。
![]()
图 2 LncRNA HCG11和miR-590-3p表达相关性分析Figure 2 Correlation analysis between LncRNA HCG11 and miR-590-3p expression1: adipose; 2: adrenal; 3: brain; 4: brain_R; 5: breast; 6: colon; 7: fores kin; 8: heart; 9: hela_R; 10: HLF_1; 11: HLF_2; 12: kidney; 13: liver; 14: liver_R; 15: lung; 16: lymph Node; 17: ovary; 18: placenta_R; 19: prostate; 20: skeltal muscle; 21: testes; 22: testes_R; 23: thyroid; 24: white blood cell. A: NONCODE database showed that the expression of LncRNA HCG11 in HeLa cells; B: starBase v2.0 databases showed that there were three binding sites between miR-590-3p and LncRNA HCG11; C: qPCR indicated that on nucleic acid level, LncRNA HCG11 expression was negatively correlated with miR-590-3p expression in squamous carcinoma of cervix tissues2.3 LncRNA HCG11和miR-590-3p与临床病理特征的相关性
肿瘤组织中LncRNA HCG11和miR-590-3p的表达水平与组织大小、淋巴结转移以及临床分期（P=0.027）有相关性，即癌组织大、有淋巴结转移、临床分期差的患者LncRNA HCG11表达水平越低，而miR-590-3p表达水平越高，见表 1。
表 1 LncRNA HCG11和miR-590-3p的相对表达情况与患者临床病理因素的关系Table 1 Relative expression of LncRNA HCG11 and miR-590-3p and their correlation with patients' clinicopathological factors
2.4 LncRNA HCG11和miR-590-3p与宫颈鳞状细胞癌患者预后的关系
根据qRT-PCR的结果，用Kaplan-Meier方法分析LncRNA HCG11和miR-590-3p在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达和患者生存期之间的关系。按照二者在癌组织中表达量中位数把患者分为高表达组和低表达组，其中LncRNA HCG11高表达者24例、低表达者34例。miR-590-3p高表达者35例、低表达者23例。随访时间15~36月，其中复发14例、死亡14例、13例因复发转移死亡、1例因放化疗相关并发症死亡。分析表明，在宫颈鳞状细胞癌患者中，LncRNA HCG11低表达患者的总生存期明显低于高表达患者（P=0.024）；miR-590-3p高表达患者的总生存期明显低于低表达患者（P=0.047），见图 3。Cox单变量分析表明肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期和LncRNA HCG11以及miR-590-3p的表达情况与生存相关。Cox比例风险模型多变量分析表明LncRNA HCG11和miR-590-3p表达情况分别是独立的危险因素（P=0.037, 0.042），见表 2。
![]()
图 3 LncRNA HCG11和miR-590-3p与患者的预后的关系Figure 3 Relationship of LncRNA HCG11 and miR-590-3p expression with patients' prognosisA: The overall survival of patients with low LncRNA HCG11 expression was obviously shorter than that with high LncRNA HCG11 expression; B: The overall survival of patients with high miR-590-3p expression was significantly shorter than that with low miR-590-3p expression表 2 58例宫颈鳞状细胞癌患者不同预后因素对OS的单因素和多因素分析Table 2 Univariate and multivariate analyses of different prognostic factors for OS of 58 patients with squamous carcinoma of cervix
2.5 Gene Oncology和KEGG通路分析
为了预测HCG11的功能，首先使用TCGA构建共表达网络识别差异表达的mRNA和HCG11基因之间的相互作用。根据Pearson相关系数建立基因共表达网络。然后使用MAS 3.0（http://bioinfo.capitalbio.com/mas3/project/index）执行GO和通路分析。根据GO分析结果把前1 000个差异表达的基因进行分类。分析显示，这些基因与信号转导、转录、细胞黏附、细胞转化和蛋白质氨基酸磷酸化相关。通路分析显示HCG11的共表达基因主要参与MAPK信号通路、钙信号通路、Jak-STAT信号通路和Wnt信号通路等。
3 讨论
非编码RNA占整个人类基因组的98%左右，包括lncRNAs和microRNAs[7]。miRNA能够结合到目标mRNA的3′UTR，调节mRNA的稳定性和翻译过程，最终导致mRNA的翻译被抑制或被降解[7-8]。miRNA可分为癌基因和抑癌基因，参与细胞的多个生物过程，包括增殖、凋亡、代谢、细胞分化等[9]。越来越多的证据表明，microRNA参与多种癌症的进展过程。与已经非常熟悉的microRNAs相比，LncRNAs方面的研究相对较少。长非编码RNA（LncRNAs）由超过200个核苷酸组成，是ncRNAs中重要的成员，不能被翻译成蛋白质[10]。到目前为止，绝大多数的LncRNAs已被鉴定出来[11-12]。许多研究已经证明，LncRNAs在癌症的发生发展中发挥了重要作用[13-15]。目前LncRNA的研究处于起步阶段，因此大多数LncRNA的功能仍是未知。LncRNA能不能作为肿瘤诊断和预后的生物标志物，以及在临床中的意义，人们还没有一个确切的结论。
目前，很多国家都在致力寻找并建立一些可以有效筛查宫颈鳞状细胞癌的项目，从而降低其发病率和死亡率。这些筛查基本需依赖细胞学巴氏涂片，有些联合检查可以预防多达91%的浸润性宫颈鳞状细胞癌[2]。然而，这些项目花费较高，因此，寻找客观精准而又方便检测的标志物，来提示发病和预后是宫颈鳞状细胞癌目前重要的研究方向。一些与宫颈鳞状细胞癌预后相关的分子虽然已得到初步证实，但是它们的作用机制仍不确定。
目前，国内外已发表的与宫颈鳞状细胞癌致病相关的lncRNA有HOTAIR[16]、MALAT1[17]、H19[18]、EBIC[19]、MEG3[20]、GAS5[21]，XLOC_010588[22]等。这7个LncRNAs在有些文献中的报道是抑癌作用，有些文献中报道是促癌作用，比如TUG1在结肠癌中表现为上调[23]，在非小细胞肺癌中表达下调[24]，与其他文献报道不同，说明LncRNAs的表达存在组织特异性、个体差异性，且在组织中表达差异并不显著，均不足以成为宫颈癌的特异肿瘤标志物。
该研究发现与癌旁组织相比HCG11在宫颈鳞状细胞癌组织中显著下调，且与肿瘤组织大小、淋巴结转移以及临床分期有关。starBase v2.0数据库分析表明miR-590-3p与LncRNA HCG11有三个结合位点。随后研究发现miR-590-3p在宫颈鳞状细胞癌组织中表达明显上调，且与组织大小、淋巴结转移、临床分期以及预后有关，而且发现LncRNA HCG11和miR-590-3p核酸水平呈显著的负相关。为了进一步探讨HCG11的功能，我们进行了GO和KEGG通路分析。结果表明受其表达影响的基因参与包括信号转导、转录调控、细胞黏附、恶性转化和氨基酸磷酸化等过程。HCG11参与MAPK信号通路、钙信号通路、Jak-STAT信号通路和Wnt信号通路的调控。
目前关于LncRNA HCG11与肿瘤研究的报道较少，其中HCG11在乳腺癌与前列腺癌中表达下调的患者预后较差。miR-590-3p与肿瘤的研究比较多，Yang等[25]发现miR-590-3p通过激活PI3K-AKT信号通路下调PTEN，促进AKT1-S473的磷酸化作用，进而发挥促进肝癌细胞增殖。Sun等[26]发现，miR-590-3p通过Hippo通路促进结肠癌细胞的增殖和转移。LncRNA的作用机制之一就是通过海绵样吸附作用，竞争性与microRNA结合，抑制其进一步发挥基因调控的作用。由此推测，LncRNA HCG11有可能通过调控miR-590-3p的表达发挥其抑癌作用。可以通过进一步的体外细胞实验对该调控机制进行验证。
Competing interests: The authors declare that they have no Competing interests.作者贡献：蒋豆豆：实验操作及论文撰写董佳文：实验操作胡德胜、周亚娟：实验设计及指导 -
![]()
图 1 转染HIF-1α-siRNA后CNE2细胞对HIF-1α基因的沉默效率(A)和MTT检测不同处理条件下CNE2细胞的增殖水平(B)
Figure 1 Silencing efficiency of HIF-1α in CNE2 cells(A) and proliferation of CNE2 cells under different treatment conditions detected by MTT(B)
![]()
图 2 流式细胞术检测不同处理条件下CNE2细胞的凋亡水平
Figure 2 Apoptosis of CNE2 cells under different treatment conditions detected by flow cytometry
![]()
图 3 RT-PCR检测CNE2细胞中HIF-1α、PD-L1及STAT3的表达
Figure 3 HIF-1α, PD-L1 and STAT3 expression in CNE2 cells detected by RT-PCR
![]()
图 4 不同条件下CNE2细胞中HIF-1α(A)、PD-L1(B)及STAT3(C)mRNA表达水平的变化
Figure 4 HIF-1α(A), PD-L1(B) and STAT3(C) mRNA expression in CNE2 cells under different conditions
![]()
图 5 Western blot检测CNE2细胞中HIF-1α, PD-L1, STAT3及pSTAT3蛋白的表达
Figure 5 HIF-1α, PD-L1, STAT3 and pSTAT3 protein expression in CNE2 cells detected by Western blot
![]()
图 6 不同条件下CNE2细胞中HIF-1α(A)、PD-L1(B)、STAT3(C)及pSTAT3(D)蛋白表达水平的变化
Figure 6 HIF-1α(A), PD-L1(B), STAT3(C) and pSTAT3(D) proteins expression in CNE2 cells under different conditions
-
[1] 许珊, 姜学钧. Dicer1低表达与鼻咽癌患者预后的关联性研究[J]. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2015, 29(2): 126-131. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-LCEH201502009.htm Xu S, Jiang XY. Reduced expression of Diceri is associated with Poor Prognosis in Patients with nasopharyngeal carcinoma[J]. Lin Chuang Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi, 2015, 29(2): 126-131. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-LCEH201502009.htm
[2] Lee C, Park SH, Yoon SY, et al. Gamma Knife Radiosurgery Using Co-Registration with PET-CT and MRI for Recurrent Nasopharyngeal Carcinoma with Previous Radiotherapy: A Single Center 14-Year Experience[J]. J Korean Neurosurg Soc, 2020, 63(3): 397-405. doi: 10.3340/jkns.2019.0011
[3] Liang XX, Li Q, Su Z, et al. Significant Prognostic impact of chemoradiotherapy-induced hemoglobin decrease on treatment outcomes of nasopharyngeal carcinoma[J]. J Cancer, 2015, 6(6): 502-510. doi: 10.7150/jca.11403
[4] Wong EHC, Liew YT, Loong SP, et al. Five-year Survival Data on the Role of Endoscopic Endonasal Nasopharyngectomy in Advanced Recurrent rT3 and rT4 Nasopharyngeal Carcinoma[J]. Ann Otol Rhinol Laryngol, 2020, 129(3): 287-293. doi: 10.1177/0003489419887410
[5] Xu Q, Briggs J, Park S, et al. Targeting Stat3 blocks both HIF-1 and VEGF expression induced by multiple oncogenic growth signaling Pathways[J]. Oncogene, 2005, 24(36): 5552-5560. doi: 10.1038/sj.onc.1208719
[6] 乌日罕, 呼群, 马强, 等. PD-1和PD-L1在肿瘤免疫逃逸中的作用机制及临床意义[J]. 现代肿瘤医学, 2019, 27(9): 1635-1638. doi: 10.3969/j.issn.1672-4992.2019.09.040 Wu RH, Hu Q, Ma Q, et al. Clinical significance and mechanism of PD-1 and PD-L1 in cancer immune escape[J]. Xian Dai Zhong Liu Yi Xue, 2019, 27(9): 1635-1638. doi: 10.3969/j.issn.1672-4992.2019.09.040
[7] Chen TC, Wu CT, Wang CP, et al. Associations among Pretreatment tumor necrosis and the expression of HIF-1alPha and PD-L1 in advanced oral squamous cell carcinoma and the Prognostic impact thereof[J]. Oral Oncol, 2015, 51(11): 1004-1010. doi: 10.1016/j.oraloncology.2015.08.011
[8] Chang YL, Yang CY, Lin MW, et al. High co-expression of PD-L1 and HIF-1α correlates with tumour necrosis in Pulmonary Pleomorphic carcinoma[J]. Eur J Cancer, 2016, 60: 125-135. doi: 10.1016/j.ejca.2016.03.012
[9] Han S, Yin X, Wang Y, et al. Co-expression of HIF-1 and TLR3 is associated with Poor Prognosis in oral squamous cell carcinoma[J]. Int J Clin Exp Pathol, 2020, 13(1): 65-72. http://med.wanfangdata.com.cn/Paper/Detail/PeriodicalPaper_PM32055274
[10] Masoud GN, Li W. HIF-1alPha Pathway: role, regulation and intervention for cancer therapy[J]. Acta Pharm Sin B, 2015, 5(5): 378-389. doi: 10.1016/j.apsb.2015.05.007
[11] Wong CA, McCarthy RJ, Fitzgerald PC, et al. Gastric emptying of water in obese Pregnant women at term[J]. Anesth Analg, 2007, 105(3): 751-755. doi: 10.1213/01.ane.0000278136.98611.d6
[12] Noman MZ, Desantis G, Janji B, et al. PD-L1 is a novel direct target of HIF-1alPha, and its blockade under hypoxia enhanced MDSC-mediated T cell activation[J]. Exp Med, 2014, 211(5): 781-790. doi: 10.1084/jem.20131916
[13] Daniel SK, Sullivan KM, Labadie KP, et al. Hypoxia as a barrier to immunotherapy in Pancreatic adenocarcinoma[J]. Clin Transl Med, 2019, 8(1): 10. doi: 10.1186/s40169-019-0226-9/fulltext.html
[14] Barsoum IB, Smallwood CA, Siemens DR, et al. A mechanism of hypoxia-mediated escaPe from adaptive immunity in cancer cells[J]. Cancer Res, 2014, 74(3): 665-674. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-13-0992
[15] Minichsdorfer C, Oberndorfer F, Krall C, et al. PD-L1 Expression on Tumor Cells Is Associated With a Poor Outcome in a Cohort of Caucasian Nasopharyngeal Carcinoma Patients[J]. Front Oncol, 2019, 9(6): 1334. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31850219
[16] Messai Y, Gad S, Noman MZ, et al. Renal Cell Carcinoma Programmed Death-ligand 1, a New Direct Target of Hypoxia-inducible Factor-2 Alha, is Regulated by von HiPPel-Lindau Gene Mutation Status[J]. Eur Urol, 2016, 70(4): 623-632. doi: 10.1016/j.eururo.2015.11.029
[17] Li X, Li C, Zhou P, et al. Inhibitory effect of icaritin on Proliferation, migration, and invasion of human nasopharyngeal carcinoma cell CNE2 by regulating STAT3 activation[J]. Pharmazie, 2019, 74(11): 685-687. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31739838
[18] Xing Y, Mi C, Wang Z, et al. Fraxinellone has anticancer activity in vivo by inhibiting Programmed cell death-ligand 1 expression by reducing hypoxia-inducible factor-1α and STAT3[J]. Pharmacol Res, 2018, 135: 166-180. doi: 10.1016/j.phrs.2018.08.004
[19] Frank A, Bonney M, Bonney S, et al. Myocardial ischemia reperfusion injury: from basic science to clinical bedside[J]. Semin Cardiothoracic Vasc Anesth, 2012, 16(3): 123-132. doi: 10.1177/1089253211436350
[20] Zhou Y, Miao J, Wu H, et al. PD-1 and PD-L1 expression in 132 recurrent nasopharynx-geal carcinoma: the correlation with anemia and outcomes[J]. Oncotarget, 2017, 8(31): 51210-51223. doi: 10.18632/oncotarget.17214
[21] Makowska A, Braunschweig T, Denecke B, et al. Interferon β and Anti-PD-1/PD-L1 Checkpoint Blockade Cooperate in NK Cell-Mediated Killing of Nasopharyngeal Carcinoma Cells[J]. Transl Oncol, 2019, 12(9): 1237-1256. doi: 10.1016/j.tranon.2019.04.017
[22] Masterson L, Howard J, Gonzalez-Cruz J, et al. Immune checkpoint inhibitors in advanced nasopharyngeal carcinoma: Beyond an era of chemoradiation[J]. Int J Cancer, 2020, 146(8): 2305-2314. doi: 10.1002/ijc.32869
[23] 江蓉, 邱艳芳, 王晖, 等. PD-L1蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义[J]. 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志, 2018, 24(6): 561-564, 570. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZEBY201806018.htm Jiang R, Qiu YF, Wang H, et al. Expression and clinical significance of PD-L1 protein in nasopharyngeal carcinoma[J]. Zhongguo Er Bi Yan Hou Lu Di Wai Ke Za Zhi, 2018, 24(6): 561-564, 570. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZEBY201806018.htm
-
期刊类型引用(7)
1. 王莉，刘慧婷，钱立庭，魏东华，马艳玲，邹明明，王德斌，柴静. 基于Markov模型的安徽省城市肺癌筛查卫生经济学评价研究. 中国肿瘤. 2025(02): 132-137 . 
百度学术
2. 沈毅钧，胡文斌，倪斌. 1981—2020年昆山市肺癌疾病负担和间接经济负担分析. 肿瘤防治研究. 2024(02): 121-126 . 本站查看
3. 吕安淇，柯佳. cGAS/STING信号通路干预肺癌的机制及中药干预研究进展. 中国实验方剂学杂志. 2024(09): 236-244 . 百度学术
4. 魏萍萍，林勇，庄晨，孟小琴，陈秋丹. 鳞状细胞癌抗原、胃泌素释放肽前体、神经元特异性烯醇化酶对肺癌的诊断价值. 癌症进展. 2024(03): 302-305 . 百度学术
5. 李艳娜，夏慧琳，朱丹丹，朱永丽. CT三维重建技术辅助单孔胸腔镜肺段切除术术前规划的临床应用价值研究. 现代仪器与医疗. 2024(04): 80-85 . 百度学术
6. 佟硕，张博洋，白玥，张斌. CT人工智能技术检查指标联合miR-33a-5p鉴别诊断亚实性结节型肺腺癌浸润程度的价值. 实用心脑肺血管病杂志. 2024(09): 91-94+98 . 百度学术
7. 黄炎. 基于Logistic回归方程分析能谱CT参数对非小细胞肺癌PD-L1表达的预测价值. 影像研究与医学应用. 2023(22): 36-38 . 百度学术
其他类型引用(2)
下载:
计量
- 文章访问数: 1272
- HTML全文浏览量: 324
- PDF下载量: 424
- 被引次数: 9
