摘要:
引言多数肿瘤和白血病患者存在细胞免疫缺陷情况, 通过T细胞受体基因分析各家族基因的表达情况, 可以进一步明确患者外周血中所缺失的T细胞亚家族的情况, 而通过T细胞克隆性分析, 可以了解患者体内是否存在白血病抗原相关的克隆性增殖T细胞, 从而为白血病特异性免疫治疗提供依据。1 材料与方法1.1 样本 收集经细胞形态学和组织化学按FAB诊断标准确诊的急性髓性白血病M 6型 (AML M 6 )病人 3例 (编号C1 C3), 10例正常人作为对照。外周血单个核细胞的分离, RNA提取和cDNA合成均按常规方法进行。1.2 RT PCR和T细胞克隆性分析 按我们以往研究报道的方法进行操作1 。首先利用 2 4个Vβ引物和一Cβ引物分别进行 2 4个PCR反应, 了解样本中各TCRVβ亚家族的表达情况, 然后利用 5'端荧光素标记的Cβ fam引物标记PCR产物, 并进一步经 6 %聚丙酰胺凝胶中电泳, 经 377ADNA序列仪 (ABI, PerkinElmer)的基因扫描 6 72分析软件分析产物的长度和荧光素强度, 从而了解所扩增PCR产物的特点, 而确定所属Vβ亚家族T细胞的克隆性1 。2 结果R...